COPAS Infinity 果蠅幼蟲流式細胞儀
COPAS Infinity 是由 Union Biometrica 公司開發的新一代「大顆粒流式細胞儀」(Large Particle Flow Cytometry)。
傳統流式細胞儀(Flow Cytometry)通常只能處理直徑小於 40 um 的單細胞,而 COPAS Infinity 專為處理大直徑(2-1500 um)且脆弱的生物樣本而設計,能在不損傷樣本活性的情況下,實現高通量的分析與自動分選。
COPAS Infinity 果蠅幼蟲流式細胞儀
在果蠅(Drosophila melanogaster)的研究中,COPAS Infinity 扮演了「自動化雙手」與「高精度眼」的角色。傳統上,果蠅的胚胎、幼蟲或蛹的挑選極度依賴人工,不僅耗時、傷眼,且容易帶有主觀誤差。
COPAS Infinity 透過其大流路設計,能針對果蠅的不同生活史階段(Life Cycles)提供自動化的分析與分選解決方案。
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果蠅研究中的具體應用場景
1. 胚胎(Embryos)的高通量篩選
果蠅胚胎大小約在 400-500 um,非常適合使用 Infinity-500 型號。
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基因型篩選: 配合螢光標記(如 GFP, mCherry),系統可以自動識別並分選出帶有特定啟動子驅動的基因表達樣本。
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發育監測: 根據胚胎在發育過程中透光度(Extinction)的變化,區分不同發育階段的胚胎。
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大規模雜交實驗: 在進行群體遺傳學研究時,自動剔除不符合表型的胚胎,只保留目標樣本進行孵化。
2. 幼蟲(Larvae)的分類與收集
幼蟲期是進行藥物篩選與毒理實驗的關鍵時期,其長度可達數毫米。
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齡期區分: 透過 TOF(飛行時間) 參數準確測量幼蟲的長度,自動將 1 齡(L1)、2 齡(L2)、3 齡(L3)幼蟲分開。
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螢光神經元研究: 檢測幼蟲神經系統中螢光蛋白的表達強度,分選出特定神經活動特徵的個體。
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高通量給藥: 將特定數量的幼蟲自動分選至 96 孔板中,每孔精確分配(如每孔 5 隻),隨後進行液態食物給藥實驗。
3. 蛹(Pupae)的自動化分選
雖然蛹是不動的,但人工挑選大量的蛹非常緩慢。COPAS 可以:
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性別鑑定: 在某些特定品系中,透過螢光差異或光學特徵自動區分雌雄蛹,這對於需要進行處女蠅雜交的實驗至關重要。
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存活率評估: 透過光密度(EXT)檢測蛹內部的發育狀態,排除發育停止或死亡的樣本。
技術優勢:為何優於人工操作?
| 比較項目 | 人工挑選(顯微鏡下) | COPAS Infinity 自動化分選 |
| 速度 | 每小時約 100 - 300 個樣本 | 每小時可達 10,000 - 20,000 個樣本 |
| 精確度 | 易受疲勞影響,主觀判定偏差 | 標準化參數檢測,重複性高 |
| 樣本損害 | 鑷子或筆刷容易造成物理性損傷 | 專利氣流分選,溫和無接觸 |
| 高通量對接 | 難以精確將特定數量放入 384 孔盤 | 直接對接 X-Y 平台,自動化分裝 |
基因篩選與突變體發現
在進行 Forward Genetics(正向遺傳學) 篩選時,研究者可能需要從數萬個突變體中找出一個螢光特徵微弱改變的個體。人工幾乎不可能完成這種規模的掃描,而 COPAS Infinity 可以在數小時內完成整批篩選,並將「疑似陽性」的樣本分選出來進行後續培養。
藥物毒理與行為研究
研究化學物質對果蠅發育的影響時,可利用 COPAS:
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將 L1 幼蟲 精確地分裝到含有不同藥物濃度的多孔板中。
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數天後,再次透過系統檢測幼蟲的 體積增長(TOF) 以及 內部代謝產物螢光,快速獲得藥效曲線。
注意事項
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樣品製備: 為了讓果蠅樣本順利通過管路,通常需要將其懸浮在特定的緩衝液或生理鹽水中(如 PBS)。
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回收培養: 分選後的果蠅胚胎或幼蟲通常會落在裝有少量培養基或水的孔盤中,可直接放回恆溫箱繼續發育。

